這部電影在荒野的西部發現了貓和老鼠二人組，他們在那里幫助從一個惡棍手中拯救了一個牧場。競爭對手聯手幫助一個女牛仔和她的兄弟從貪婪的土地掠奪者手中拯救他們的家園。杰瑞的三個早熟的侄子也加入了行動，湯姆圍捕了一隊土撥鼠。...

迪恩（簡森·阿克斯JensenAckles飾）和薩姆（賈德·帕達里克JaredPadalecki飾）終于找到父親約翰（杰弗瑞·迪恩·摩根JeffreyDeanMorgan飾），但為了救迪恩，約翰甘愿深入地獄，留下兄弟兩個繼續完成“獵人”職責。同時兄弟倆也了解到“黃眼惡魔”的存在，開始一路追蹤這個最大仇人。二人解決了一個又一個超自然生物，兄弟二人的性格、理想分歧也一直存在，不時吵吵鬧鬧。但薩姆終究是...